回答1、常用配方:去皮馬鈴薯200g、葡萄糖20g、瓊脂10-20g、水1000ml。2、制作方法:將馬鈴薯去皮洗凈,切成小塊煮至熟而不爛,過濾加水至1000ml;將瓊脂剪成小段,放入鍋內(nèi),邊攪邊煮,溶化后加入葡萄糖;裝管前取一小勺浮在涼水中冷卻觀察其硬度適合然后分袋試管,用棉花塞塞住試管口,進行滅菌;采用組織分離法,通常是從食用菌子實體內(nèi)部分離純菌種;經(jīng)過10天左右菌絲長滿瓶,母種即制作成功。
一、怎樣制作菌種母種
1、母種,又稱為一級種,用直徑18-22cm的試管制備。常用配方:去皮馬鈴薯200g、葡萄糖20g、瓊脂10-20g、水1000ml。
2、制作方法:
(1)將馬鈴薯挖去蟲眼,去皮洗凈,切成小塊煮至熟而不爛,過濾加水至1000ml。
(2)將瓊脂剪成小段,放入鍋內(nèi),邊攪邊煮,待瓊脂溶化后加入葡萄糖。
(3)由于瓊脂品質(zhì)各有不同加入份量要根據(jù)實際情況而定,裝管前取一小勺浮在涼水中冷卻觀察其硬度適合然后分袋試管,用棉花塞塞住試管口,放入小高壓鍋內(nèi)滅菌,當(dāng)壓力表達到1.5個壓力時,再滅菌30分鐘。讓其自然冷卻,取出放置在接種箱中備用。
(4)采用組織分離法,通常是從食用菌子實體內(nèi)部分離純菌種,操作時,從子實體內(nèi)切取一小塊組織,放在培養(yǎng)基中培養(yǎng)可長出純菌種,且菌絲萌發(fā)快,遺傳性狀穩(wěn)定,后代不易發(fā)生變異。
(5)取出試管放成斜面,放置2-3天后,無雜菌感染再放入接種箱內(nèi)接種,接了種的試管放入培養(yǎng)室內(nèi)進行培養(yǎng),溫度要求25℃左右,相對濕度75%以下。發(fā)現(xiàn)污染及時挑出,經(jīng)過10天左右菌絲長滿瓶,母種即制作成功。
二、菌種如何脫毒
1、菌種的脫毒,一般可借鑒植物的脫毒技術(shù)。所謂植物脫毒,是將植物莖尖生長尖端組織進行分離,將分離組織置于特定培養(yǎng)基中進行培養(yǎng),從而獲得脫離原體病毒、病菌的新生種苗。具體的脫毒方法有菌絲尖端脫毒法、原基組織脫毒法等。脫毒菌種恢復(fù)了菌種原有的生物特性,使菌種的抗性得到了增強,抗病力得到了提高。
2、菌絲尖端脫毒法,一般使用規(guī)格為90mm或110mm的培養(yǎng)皿,無此規(guī)格培養(yǎng)皿時,可改用規(guī)格為25mm*200mm的大型試管,但操作不太方便。原基組織脫毒技術(shù),最大程度革除了原有組織分離時子實體處于生長中后期攜帶病毒、病菌可能性極大等弊端,真正實現(xiàn)了分離尖端組織脫毒的目的。