回答使用馬鈴薯200g、葡萄糖20g、瓊脂20g、水1000ml配制培養(yǎng)基,馬鈴薯去皮后切塊洗凈,加水1000毫升,文火煮沸30分鐘后過濾取汁,將瓊脂放入液體內(nèi)文火煮沸,不斷攪拌至溶解,培養(yǎng)基煮好后趁熱分裝試管,塞上棉塞,包扎塑料薄膜,放入滅菌鍋,之后拿出斜放,冷卻后即凝固成斜面培養(yǎng)基。
一、準(zhǔn)備用品與試劑
主要包括各種營養(yǎng)物質(zhì)、高壓滅菌鍋、天平、棉塞、試管(20毫米×200毫米)、稀堿液(1摩爾/升NaOH溶液,即4克氫氧化鈉溶于100毫升水)、稀酸液(1摩爾/升鹽酸溶液,即84毫升濃鹽酸加水916毫升)等。
二、培養(yǎng)基配方
1、馬鈴薯200g、葡萄糖20g、瓊脂20g、水1000ml。
2、馬鈴薯100g、麩皮100克、蔗糖20g、KH2PO4 1g,MgSO4 0.5g、瓊脂20g、水1000ml。
3、馬鈴薯200g、蔗糖20g、KH2PO4 2g,MgSO4 0.5g、維生素B1 20毫克、瓊脂20g、水1000ml。
三、培養(yǎng)基配制
1、馬鈴薯等塊莖、植物根去皮后切塊洗凈,加水1000毫升,文火煮沸30分鐘后過濾取汁,其他各種成分稱量要準(zhǔn)確,配制過程中葡萄糖要最后加入,靈芝一般要求PH5.5-6,用稀堿1摩爾/升Na〇H、稀酸1摩爾/升HC1來調(diào)整酸堿度至適度為止。將瓊脂(若為條形需剪短)放入所配液體內(nèi),文火煮沸,煮時不斷攪拌至溶解。
2、培養(yǎng)基煮好后趁熱分裝試管,裝量為試管長度的四方之一左右,然后塞上棉塞。傾倒時要防止培養(yǎng)基沾污管口,一旦沾上應(yīng)用紗布擦凈。試管要事先洗凈,嚴(yán)防油污。棉塞用未脫脂普通棉花,大小、松緊適中,要求與管壁緊貼。
四、滅菌與培養(yǎng)
棉塞端包扎塑料薄膜,放入滅菌鍋,經(jīng)高壓滅菌后,除去包扎的薄膜,直立于容器或框架內(nèi),使管內(nèi)水蒸氣向外界散發(fā),當(dāng)溫度下降至50℃左右時(取試管1支貼放臉上,很燙但能放得住,約為50℃左右),即可整捆斜放在斜面板上,斜面長度不超過管長的二分之一,冷卻后即凝固成斜面培養(yǎng)基。